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碘是人體必需的元素。碘進(jìn)入體內(nèi)可隨食物、飲水、食鹽等途徑攝取，其中90%由腎臟排出。尿碘可大致反應(yīng)碘攝入量和血液中的含碘量，碘缺乏和碘過量都可導(dǎo)致一系列疾病。因此，探討尿碘的分析方法對指導(dǎo)工業(yè)生產(chǎn)，為人群健康監(jiān)護(hù)提供早期敏感指標(biāo)有一定意義。實(shí)驗(yàn)室參照尿中碘的砷鈰催化分光光度測定方法(WS/T107-2006)對測定尿中碘進(jìn)行了研究，總結(jié)了影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的幾個(gè)方面因素，使實(shí)驗(yàn)更易于操作和控制減少測定誤差，結(jié)果較為滿意。
1材料與方法
1.1原理
采用過硫酸銨溶液在100 ℃條件下，消化尿樣與標(biāo)準(zhǔn)， 利用碘對砷鈰氧化還原反應(yīng)的催化作用，H3AsO3 + 2Ce4+ +H2O → H3AsO4 + 2Ce3+ + 2H+ ，反應(yīng)中黃色的Ce4+被還原成無色的Ce3+ ，碘含量越高，反應(yīng)速度越快，所剩余的Ce4+則越少，控制反應(yīng)溫度和時(shí)間，于420 nm波長下測定體系中剩余Ce4+的吸光度值，求碘含量。
1.2儀器
UV754N紫外可見分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，DC-0515低溫恒溫槽(30±0.2℃)，多孔電熱消化器(孔間溫度≤1℃)，IKA旋渦混合器。
1.3試劑
尿中碘的砷鈰催化分光光度測定方法(WS/T107-2006)配套試劑盒(生產(chǎn)日期：110523 有效期至：111123 武漢眾生生化技術(shù)有限公司)
1.4分析步驟
1.4.1尿碘標(biāo)準(zhǔn)系列(ug/L)：0、50、100、150、200、250、300
1.4.2測定
分別取0.25mL碘標(biāo)準(zhǔn)使用系列溶液及尿樣(取樣前需搖勻尿液，使所有沉淀物混懸；如果尿樣的碘濃度超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的點(diǎn)濃度范圍，則作適當(dāng)稀釋后取樣)各置于玻璃試管中，各管加入1mL過硫酸銨溶液，混勻后置于控溫100℃的消化控溫裝置中，消化60min，取下冷卻至室溫后置于30℃恒溫槽中。各管加入2.5mL亞砷酸溶液，充分混勻后放置15min，使其溫度達(dá)到平衡；秒表計(jì)時(shí)，依順序每管間隔相同時(shí)間(30s)向各管準(zhǔn)確加入0.30mL硫酸鈰銨溶液，立即混勻。待第一管(即標(biāo)準(zhǔn)系列中加300ug/L碘濃度管)反應(yīng)時(shí)間29min時(shí)(吸光度值達(dá)到0.15~0.20之間)，依順序每管間隔同樣時(shí)間(30s)于420nm波長下，用1cm比色杯，以水作參比，測定各管的吸光度值。
1.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：以吸光度值為橫坐標(biāo)，以碘標(biāo)準(zhǔn)使用系列溶液的碘濃度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線的碘濃度C與吸光度值A(chǔ)的回歸方程為C=a+bLnA，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程，將樣品管的吸光度值代入此方程，求出所測樣品中碘濃度。
1.4.4 校準(zhǔn)結(jié)果： 標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程 C= -137.06Ln(A)+50.298相關(guān)系數(shù)R=0.9997詳見表1
2結(jié)果
2.1檢出限和最低檢出濃度：
重復(fù)檢測空白管(0管)吸光度值(n=12)，測定數(shù)據(jù)見表1
2.2 精密度試驗(yàn)：
2.2.1 樣品溶液：分別加入0.5、1.5、2.5mL碘標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/mL)到100ml容量瓶(A級)中，用尿液混合液定容至100ml，此分別為樣品溶液1(低濃度)，樣品溶液2(中濃度)，樣品溶液3(高濃度)，每個(gè)濃度配制4個(gè)平行樣。
2.2.2 同測定標(biāo)準(zhǔn)系列操作步驟測定高中低三個(gè)濃度級別的樣品溶液的濃度。結(jié)果見表2：
2.3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)
2.3.1 環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)樣品：編號GBW09108、GBW09110 ，定值日期2011年1月 ，有效期限2013年1月， GBW09108: 標(biāo)準(zhǔn)值73μg/L，不確定度9.0μg/L；GBW09110：標(biāo)準(zhǔn)值206μg/L，不確定度10μg/L按證書要求稀釋后測定。結(jié)果如下；
2.3.2此次標(biāo)準(zhǔn)樣品測試結(jié)果滿意。
3討論
3.1實(shí)驗(yàn)室環(huán)境及器材
本法測定尿碘是微克及數(shù)據(jù)，因此環(huán)境中微量碘的污染都可能造成實(shí)驗(yàn)的失敗。所以實(shí)驗(yàn)前應(yīng)以0.5%的硫代硫酸鈉溶液擦拭實(shí)驗(yàn)桌面，并對實(shí)驗(yàn)室墻面進(jìn)行噴灑后開窗通風(fēng)的方式除碘，減少實(shí)驗(yàn)污染。實(shí)驗(yàn)所用玻璃儀器用1:5的鹽酸溶液浸泡12~24小時(shí)后，用自來水沖洗干凈，并用蒸餾水潤洗3遍，放置除碘實(shí)驗(yàn)室自然風(fēng)干，切忌用烘箱烘干。每次實(shí)驗(yàn)前應(yīng)測定多孔電熱消化器的孔間溫差(≤1℃)，盡量不采用邊緣消化孔，以減小孔間溫差。
3.2實(shí)驗(yàn)溫度時(shí)間控制
樣品100℃消化60min后，需取出冷卻至室溫再置于低溫恒溫槽中。加入硫酸鈰銨溶液后應(yīng)根據(jù)低溫恒溫槽中實(shí)際溫度確定水浴時(shí)間。如夏天水浴溫度超過30℃，則相應(yīng)縮短水浴時(shí)間，效果較為理想。標(biāo)準(zhǔn)方法要求標(biāo)準(zhǔn)系列中300μg/L碘濃度管的吸光度值達(dá)到0.15～0.20時(shí)，于420 nm波長，以1 cm比色杯，用水做參比，測定各管吸光度值。應(yīng)該反復(fù)多次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證最適當(dāng)?shù)奈舛戎导八r(shí)間來開始測定。
3.3樣品保存條件和時(shí)間
為保證尿樣碘含量的穩(wěn)定性，樣品在4℃冰箱可保存一個(gè)月，但不可冷凍保存。
3.4空白對照和標(biāo)準(zhǔn)系列
由于尿樣在消化過程中缺乏特異性終點(diǎn)指示，另外每批消化溫度及時(shí)間很難控制一致，所以每批樣品消化均需設(shè)置空白(0管)和標(biāo)準(zhǔn)系列。當(dāng)空白吸光度小于1時(shí)，則應(yīng)排查是否存在碘污染。
